Líneas de investigación
La principal línea de investigación tiene como objetivo el estudio de los mecanismos de señalización en espermatozoides en sistemas in vitro: capacitación y criopreservación, además de analizar su efecto en el tracto genital de la hembra y, finalmente la definición de biomarcadores de fertilidad en el macho.
En animales con fecundación interna, en diversos taxones/clases de animales, un macho transfiere a la hembra no solo espermatozoides sino también un líquido bastante complejo conocido como líquido seminal o plasma seminal, que contiene proteínas, péptidos, citoquinas y ARN, entre otros componentes. Cada vez hay más datos que sugieren que el líquido seminal influye en la supervivencia de los espermatozoides fertilizadores durante varios intervalos, al modular el sistema inmunológico de la hembra para tolerar los antígenos paternos y, en los mamíferos, hacia la tolerancia de los fetos y la placenta hasta el término. El grupo de investigación tiene como principal objetivo determinar las funciones de señalización de los exosomas del líquido seminal/plasma y su carga de ARN codificantes y no codificantes (con especial atención a los ARN pequeños) en Sus scrofa (cerdo), de fertilidad comprobada. Para ello se analiza de los componentes del plasma seminal y su posible aplicación en la mejora de dos procesos in vitro, la capacitación y la criopreservación. Además, el estudio detallado de la fisiología de los cambios que se producen tras la capacitación y criopreservación, así como el efecto diferencial del tratamiento de los grupos de espermatozoides en los epitelios de los sitios de almacenamiento de espermatozoides femeninos (unión útero tubárica), son dos de los objetivos secundarios del grupo de investigación. Además, la definición del efecto de tales cambios en variaciones en la expresión de genes relacionados con el proceso inmunológico podría representar un mecanismo básico que rige la fertilización interna, garantizando así un desempeño reproductivo exitoso. El conocimiento generado ayudará potencialmente a mejorar las técnicas de reproducción artificial, el diseño de nuevos diluyentes de semen y consideraciones para modular los procesos inmunológicos en la reproducción.
Metodologías y técnicas
- Análisis de la motilidad espermática y parámetros cinéticos, mediante sistema CASA.
- Análisis mediante epifluorescencia y/o citometría de flujo de: integridad de membrana, estado de la membrana acrosomal, cambios tempranos de desestabilización de membrana, potencial mitocondrial, indicadores de estrés oxidativo (ROS), peroxidación lipídica, análisis de la capacitación.
- Análisis de proteínas mediante Western Blotting o proteómica masiva (LC-MS/MS).
- Análisis de ARN codificante y no condificante, mediante RT-qPCR o secuenciación de ARN.
- Extracción, cuantificación y caracterización de vesículas extracelulares.
- Criopreservación y manejo in vitro de espermatozoides.