Producción forestal

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Análisis de actividad hormonal en muestras de suelo, sedimento o agua mediante ensayos de transactivación

Este servicio permite detectar la presencia de disruptores endocrinos en muestras ambientales (suelos, sedimentos, lodos de depuradora, aguas) y piensos. Es posible determinar la presencia de compuestos con actividad hormonal a nivel del receptor de estrógenos, andrógenos y de hormonas tiroideas mediante el uso de bioensayos in vitro.

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El declive de la capacidad reproductiva de las poblaciones de numerosas especies de animales, incluyendo invertebrados, anfibios, aves, peces, y mamíferos se ha incrementado notablemente en las últimas décadas. Se ha asociado a la exposición a contaminantes ambientales con capacidad de alterar el sistema hormonal, conocidos como disruptores endocrinos (DEs). Los DEs ocasionan efectos a dosis de exposición muy bajas. Además si se encuentran diferentes DEs en una misma muestra pueden presentar efectos aditivos, sinérgicos o antagónicos. Por lo tanto, para poder identificar la capacidad de muestras ambientales contaminadas con DEs para producir efectos en organismos expuestos a las mismas, es importante conocer el efecto global de la muestra en lugar de los contenidos en DEs.

En nuestro laboratorio contamos con líneas celulares que han sido transfectadas de manera estable con el gen de la luciferasa acoplado a elementos de respuesta a hormonas. Así, cuando uno de los receptores para hormonas (estrógenos, andrógenos u hormonas tiroideas) se activa o se bloquea por los DEs, aumenta o disminuye la expresión de la luciferasa y ésta es fácilmente medible mediante bioensayos de luminiscencia.

Nuestro servicio de detección de DEs da respuesta a la necesidad de conocer:

La actividad hormonal global de muestras procedentes de granjas, depuradoras, plantaciones agrícolas etc.
La eficacia de sistemas de mejora destinados a reducir la contaminación.

Características

La técnica se basa en la detección de sustancias con capacidad de ser alteradores endocrinos mediante su unión a receptores hormonales utilizando líneas celulares transfectadas con los receptores de estrógenos, andrógenos y hormonas tiroideas.
Líneas celulares validadas por la OCDE para el screening de sustancias químicas con capacidad hormonal. Contamos con diferentes líneas celulares validadas por la OCDE: AR Eco-Screen, PC-DR-Luc, Hela-9903, entre otras desarrolladas y validadas en nuestro laboratorio.
Límites de detección bajos. Los resultados obtenidos se presentan en términos de equivalentes de hormona (Eq-H). Los límites de detección son del orden de ng Eq-H/g de muestra o ng Eq-H/ml de muestra.
Precisión. A diferencia de las técnicas analíticas que determinan la sustancia presente, esta técnica permite medir la actividad hormonal y/o anti-hormonal global de la muestra, es decir, la interacción de la mezcla de sustancias presentes en la muestra.
Rentabilidad y rapidez. Es una técnica rápida y económica. En un tiempo estimado de 10 días desde la recepción de la muestra podemos emitir un informe de resultados.

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Preguntas frecuentes

¿Qué es un disruptor endocrino (DE)?

Son sustancias o mezclas de sustancias que alteran las funciones del sistema endocrino causando efectos adversos sobre la salud de los organismos, su progenie o sus poblaciones.

¿Es posible detectar simultáneamente los tres tipos de DEs en una misma muestra?

A partir de una única muestra podemos evaluar la presencia de DEs con capacidad de activar o bloquear al receptor de estrógenos, andrógenos y de hormonas tiroideas.

¿La técnica permitiría detectar diferentes estrógenos, andrógenos u hormonas tiroideas?

Mediante los bioensayos in vitro de transactivación del gen de la luciferasa no identificamos las sustancias responsables de activar o bloquear a los receptores hormonales. Evaluamos de manera global la actividad hormonal o anti-hormonal de la muestra, teniendo en cuenta reacciones sinérgicas, aditivas o antagónicas que pueden darse en muestras tan complejas como las ambientales.

¿Qué cantidad de muestra es necesaria para poder hacer la detección de DEs?

La cantidad de muestra que se necesita es escasa, nuestra metodología de extracción ha sido puesta a punto para trabajar con cantidades en torno a los 10-30 g de peso seco y con menos de 1L en el caso de muestras líquidas.

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Email de contacto: fcruz@inia.es
Teléfono de contacto: 91 347 8788